1 材料与方法
1.1 仪器与试药日本岛津甲溶液输送泵; 上海恒平的紫外检测器; 奥豪斯仪器上海有限公司移液器AH-10；奥豪斯电子天平(CP153型) 。绿原酸对照品, 供含量测定用，中药品生物制品检定所提供。乙睛, 色谱纯, 美Fi sher 公司; 其它试剂均为分析纯。
1.2 色谱条件（250x4.6mm) 色谱柱, 柱温:30 ℃ ;流动相: 乙睛一.0 4 % 磷酸( 10:90 ), 流速: 1.0ml/min ; 检测波长: 327nm。在此色谱条件下, 供试品色谱中, 在与对照品色谱相同的保留时间处有色谱峰(保留时间19分钟）。
1.3 利用奥豪斯电子天平CP153型精密称定50g样品, 置锥形瓶中, 用奥豪斯移液器精密量取加人50 % 甲醇溶液，在称定重量, 超声处理( 功率巧150w，频率20khz) 30分钟, 取出, 在用奥豪斯电子天平称定重量, 用50 % 甲醇溶液补足减失的重量, 摇匀, 滤过, 作为供试品溶液。
2 系统适应性试验
2.1 柱效的考察按正文方法测定绿原酸的对照品色谱图, 测得理论板数绿原酸峰计算不低于4000。在此条件下样品可得到很好的分离, 主峰前后无杂质蜂, 分离度符合规定。
2. 2 测定波长的选择取绿原酸对照品溶液( 30ug/L), 照紫外分光光度法, 在10 一3 70 mn 波长范围内测定吸收度, 绘制曲线, 对照品溶液在3 27nm处有大吸收, 故选择327 mn 为测定波长。
2.3 标准曲线的制备:利用奥豪斯电子天平精密称取绿原酸对照品, 加50 % 甲醇制成每1ML含31.2mg 的溶液, 在用奥豪斯移液器精密吸取此液4,7,10ul各注人液相色谱仪, 测定, 以峰面积积分值为纵坐标, 绿原酸含量为横坐标绘制标准曲线。得到一近似通过原点的直线。结果表明, 绿原酸量在124.8-499.6ug范围内, 峰面积积分值与绿原酸含量呈良好线性关系。
2.4 重现性试验按本文绿原酸含量测定项下操作, 对同一批样品制成5 份供试品溶液, 依次进样测定, 用测定值的相对偏差反应测定结果的重现性。结果Rs D 为1.47 %。
2.5 精密度及稳定性测定按本标准中含量测定项下操作. 取同一供试品,每隔一段时间重复进样测定, 用测定值的相对标准偏差反应测定结果的精密度、稳定性, 结果表明, 本方法精密度良好, 样品在8小时内测定稳定。
2 .6 回收率试验用奥豪斯电子天平CP153型分别精密称取已知含量( 0.55mg/粒) 的样品0.60g 共计5 份, 置锥形瓶中, 精密加人绿原酸对照品溶液(0.120mg/ml)5.0ml ，再精密加入50 % 甲醇超声处理30 分钟, 按含量测定项下方法进行操作, 同法制得5 组供试品溶液, 按本标准“ 含量测定”项下方法进行测定, 计算回收率。
2.7 样品测定采用本标准含量测定项下方法, 要对本品10 批样品中绿原酸的含量进行测定, 结果见表讨论为保证制剂质量, 试验中采用本标准中“ 含量测定” 项下方法, 测定了不同来源的返魂草药材中绿原酸的含量。并限定返魂草药材以干燥品计算, 含绿原酸不得少于0.12 % 。考虑药材产地、加工及生产等因素的影响, 标准中限定制剂中每粒胶囊中含返魂草以绿原酸不得少于o.32 mg。
